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实验检测需要注意那五个实验细节

文字:[大][中][小] 2017-3-20    浏览次数:782    

实验的成功率很重要,而要提高成功率,就必须注意细节。以下是做实验需要注意的五大细节:由上海恋心生物为您精心编辑,感谢您对上海恒远生物的支持与信赖,祝您购物愉快!

一 记录

人的记忆力是有限的,在做实验的时候,不可能记住做过的每一步。例如实验记录如果不及时写,第二天就会忘记很多,一周之后就完全忘记了。所以做实验一定要做好实验记录。记录一要及时,否则就会忘记,最好是随时记录。二要详细,因为一个很小的细节可能就是实验失败或者成功的原因,如果没有记下这个细节, 实验出问题了就难以找到原因。 例如做实验用的试剂是哪一瓶,什么时候配的(尤其是容易失效的试剂),如果是用 PBST 配的 5%BSA,加了0.02%的 Sodium Azide 抑制微生物生长,就应该记录为5%BSA.PBST.N3Na,而是5%BSA。三要整洁,如果过于潦草,看起来很不方便,需要找相关信息的时候就难以找到。配好的试剂做好标签也是一种记录,标签一定要详细:包括试剂名称、配置日期、配置者及其它必要信息。在配试剂的时候,为了防止忘记贴标签的情况,应该先贴标签,再加试剂。电子记录有易于检索的优点,对于某些重要信息,可以记录到电子文档(例如 word 文档)里面。

二 核查

很多时候,我实验失败的原因是没有仔细核查,例如没有核查果蝇的表型,没有仔细检查试剂的标签,没有核查离心机的转速,没有检查 heat block 的温度等等。每一个小错误都可能导致实验失败,所以一定要养成仔细核查的习惯。具体来说,在加试剂的时候,一定要仔细核查标签(包括试剂名称、 配置日期),是否有沉淀,颜色是否改变等;使用仪器的时候, 要核查设置, 例如温度、 转速、 时间设置等; 电泳的时候, 要核查是否有气泡冒出; 使用实验动物的时候,要核查表型等。

       三 分装

       谚语说:不要把所有鸡蛋都放到同一个篮子里。同样,在做实验的时候,有时也不要 把所有试剂都放到同一个容器里。分装有很多好处。第一,保险。可以防止因为污染、变质等原因损失全部试剂或者样品。第二,容易混匀。结冰的试剂需要全部溶解然后 vortex 才可以混匀,如果很大体积,有时会等不及全部溶解 就开始加样,会导致浓度不均。一般 溶液都是先溶解溶质浓度高的,就像是结冰的汽水一边融化一边喝,一开始很甜,最后几乎 没有甜味了,是因为糖份的存在会降 低熔点,含糖量高的先溶解了。分装后,每一管溶液 量小,解冻时容易全部溶解。注意在分装的时候一定要全部溶解并充分混匀。第三,延长保质期。很多试剂都要低温保存。如果不分装,每次使用的时候都全部受热一次,变质就会很快。分装之后,每次使用只有少量试剂受热,其它的还可以继续保持于低温,可以延长使用寿 命。抗体、体积较大的酶、热不稳定的其它试剂等最好分装保存于­20 度或者更低的温度。

       四 混匀

       实验对很多试剂的用量都有明确要求。要保证实验的成功和可重复性,必须保证试剂用量一致。用量等于体积乘以浓度,如果溶液不混匀的话,浓度就会不同,即使加样体积一样,实际的量也可能不一样。所以,一定要保证试剂是充分混匀。结冰的试剂,必须完全溶解才可以使用。 容易沉淀的试剂, 使用之前必须充分vortex 后再快速离心一下才能使用。

       五 备份

       在《At the bench》一书里,作者说如果实验室发生起火等危急情况,首先应该抢救的不是试剂,而是实验记录。因为有了实验记录才可以完成论文。其实,为了防止实验记录丢失的情况,可以把实验记录扫描为PDF文档以备份。同时,对于重要的研究数据,最好整理成电子文档例如 excel 或 word 文档,并且养成对自己的电脑文件定期备份的习惯。此外,质粒、转化后的细菌也需要备份。最好备份两份以降低丢失的概率。




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